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技術(shù)文章

Technical articles

2014
3-25

人血漿中緩激肽的MS定量檢測方法
緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽，由蛋白質(zhì)的激肽基團(tuán)衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強(qiáng)、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動(dòng)的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子，還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴(kuò)張，從而導(dǎo)致血壓降低。因此，對這種激素肽的變化進(jìn)行高靈敏度、高選擇性和高準(zhǔn)確度地定量，并將其作為疾病進(jìn)展或藥物治療的評估指標(biāo)，將會(huì)極為有利。盡管以往都是通過配體結(jié)合試驗(yàn)(LBAs)對生物制劑進(jìn)行定量分析，但在過去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已...
2014
3-21

核酸分離與純化的原則
材料與方法的選擇(一)材料與方法的選擇臨床常見的標(biāo)本有血液，尿液，唾液，組織及培養(yǎng)細(xì)胞等；核酸分離與純化的方法非常多，如何恰當(dāng)?shù)厥占c準(zhǔn)備材料，選擇適宜的分離與純化方法是一個(gè)首要的問題。首先我們應(yīng)當(dāng)明確核酸的分離與純化并不是zui終的目的，不同的實(shí)驗(yàn)研究與應(yīng)用對核酸的產(chǎn)量，完整性，純度和濃度可能有不同的要求；至于分離與純化核酸所需的時(shí)間與成本也往往需要考慮；在不影響核酸質(zhì)量的情況下，應(yīng)選擇安全無毒的試劑與方案。近年來，有關(guān)試劑盒的開發(fā)與自動(dòng)化儀器的使用，能批量制備核酸樣品，大...
2014
3-17

細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)原理
細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞膜是一選擇性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿過質(zhì)膜。當(dāng)細(xì)胞壞死時(shí)，質(zhì)膜不完整，PI就進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，它可嵌入到DNA或RNA中，使壞死細(xì)胞著色，凋亡細(xì)胞和活細(xì)胞不著色。而一些活細(xì)胞染料由于為親脂性物質(zhì)，可跨膜進(jìn)入活細(xì)胞，因而可進(jìn)行活細(xì)胞染色。Hoechst33342是一種活性熒光染料且毒性較弱，它是雙苯并咪唑的一種衍生物。與DNA特異結(jié)合（主要結(jié)合于A-T）堿基區(qū)），顯示凋亡細(xì)胞和活細(xì)胞。凡是看到有凋亡小體的細(xì)胞都是凋亡細(xì)胞。細(xì)胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源...
2014
3-11

動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中定量的核酸檢測技術(shù)
在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中核酸檢測技術(shù)大多數(shù)無需要求定量，所以在這只作簡單介紹。核酸檢測的定量化在人醫(yī)臨床和動(dòng)物疫病基礎(chǔ)研究中應(yīng)用較多，可用于病情評估、療效預(yù)測和觀察及預(yù)后判斷、疫病的病理分析，具有一定的應(yīng)用價(jià)值。核酸的定量檢測一般有以下兩種方法。(1)定量的核酸雜交技術(shù)此類技術(shù)以分支鏈DNA信號放大技術(shù)(branchedDNAsignalamplificationassay，bDNA)為典型代表，bDNA技術(shù)系美國Chiron公司的，屬于一種改良的核酸雜交技術(shù)，它定量的基本原理是樣品...
2014
3-7

上海恒遠(yuǎn)告知：抗磷脂抗體檢測方法
檢測APLAzui敏感試驗(yàn)是1983年介紹的ACLA的檢測，后來這種方法得到不斷改進(jìn)，血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)：用純心磷脂的無水乙醇溶液(50／11)包被聚苯乙烯反應(yīng)板，常規(guī)方法洗滌后，用10％的BSA封閉；加l：50稀釋的待測血清，37~C孵育30rain；洗板后，再分別加入HRP標(biāo)記的抗人γ(1：1500)、抗α(1：1000)、抗μ(1；8000)鏈的F(ab)2片段，37℃30min然后，OPD顯色，加終止液。492nm波長測吸...
2014
3-3

ELISA常用結(jié)果判定的方法
1．定性測定(1)陽性判定值法(cut-offvalue，CO值)：一般為陰性對照的平均A值加一個(gè)常數(shù)，試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化，要先計(jì)算出陽性對照A值平均數(shù)和陰性對照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽性。(2)抑制率法：在競爭抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。抑制率(％)＝(A陰性對照A-A待測)／陰性對照X100％,一般以抑制率≥50％為陽性2。半定量測定結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后，進(jìn)行ELISA檢測，在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度”。3。定量測定即用己...
2014
2-28

酶標(biāo)儀使用注意事項(xiàng)
1、工作環(huán)境酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器，因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，還能夠延長其使用壽命。A.儀器應(yīng)放置在無強(qiáng)磁場和干擾電壓的位置。B.儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。C.為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射。D.操作環(huán)境溫度應(yīng)在15°C~40°C之間，環(huán)境濕度在15%~85%之間。E.操作時(shí)電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。F.操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽、煙塵。G.保持干燥、干凈、水平的工作臺(tái)面，以及足夠的操作空間。2、操作注意事項(xiàng)許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判...
2014
2-24

姬姆薩復(fù)合染液常見問題
姬姆薩復(fù)合染液常見問題：Q1:如需冷藏，冷凍保存時(shí)，具體應(yīng)保存在幾度（℃）的好?A1:我們推薦的冷藏保存溫度為0℃～10℃之間，冷凍保存的溫度在0℃以下。如未注明保存溫度，原則上保存在15℃以下的陰涼處。Q2:我想知道產(chǎn)品的使用期限?A2:原則上來說，并沒有設(shè)定試劑的使用期限或保質(zhì)期限。因?yàn)樵噭?huì)因保管條件或其中混入的極微量不純物等的原因，產(chǎn)生經(jīng)時(shí)變化，因此很難嚴(yán)格斷定使用期限或保質(zhì)期限。Q3:為什么標(biāo)有冷藏保存的產(chǎn)品沒有用冷藏運(yùn)輸呢?A3:并不是說保存時(shí)的溫度條件與運(yùn)輸時(shí)的...

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