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            今日分享:ELISA實驗條件如何選擇
            更新時間:2016-09-06 點擊次數(shù):1976

               在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇十分重要,今日上海恒遠(yuǎn)就帶您大概了解一下實驗條件的選擇包括哪些:
            1.固相載體的選擇:
               載體的種類有多種,如聚苯乙烯,聚氯乙烯和纖維素等,我們通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板,其優(yōu)點在于吸附蛋白的性能較好,操作簡便、用量小、適于大批檢測。
            2.載體的吸附條件:
               載體的吸附均為物理吸附,吸附一般要求PH在9.0~9.6之間。時間、溫度、蛋白的濃度、離子的強(qiáng)度一定要恰到好處。一般采用4℃過一夜。   
            3.酶標(biāo)抗體使用濃度的確定:
               于聚苯乙烯板中加足夠的抗體包被溫育一定時間, 酶標(biāo)結(jié)合物倍比稀釋,找出OD值1,為zui合適酶標(biāo)抗體稀釋度。 
            4.抗原的要求:
               用于ELISA的抗原必須采用相當(dāng)純的抗原,如果含有其它雜質(zhì),將與抗原共同競爭的固相載體上的有限位置。
            5.抗體的要求:
               一定是要與抗原對應(yīng)的抗體,化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)上其具有很高特異性反應(yīng)。
            6.反應(yīng)時間:
               抗原與抗體、抗體與酶標(biāo)抗體反應(yīng)一般在37度1~2小時達(dá)到高峰。時間太短敏感性下降,時間太長吸附的抗原或復(fù)合物可能脫落。

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