靈敏度高是ELISA試劑盒的一大優(yōu)點(diǎn)，而這其實(shí)也是和檢測樣本有些關(guān)聯(lián)的，我們一般說來，如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高，則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低，則必須考慮靈敏度的問題。
一般來說，試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的，低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān)，所以結(jié)果是有偏差的，是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差，所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí)，應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值，而不是試劑盒上寫的靈敏度。
那么ELISA試劑盒檢測哪些范圍呢？一般說來，診斷試劑的檢測范圍以ng/ml計(jì)。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白，范圍可隨樣本的類型而變化。所以實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法確定樣本是否在所購試劑盒的范圍內(nèi)，如果不在檢測范圍內(nèi)，分兩種情況對待。
A、如果樣本中目標(biāo)蛋白太低，需找相應(yīng)靈敏度更高的試劑盒來檢測或濃縮樣本；
B、如果樣本中目標(biāo)蛋白太高，則需要進(jìn)一步稀釋后進(jìn)行檢測
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