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            ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差是何原因
            更新時(shí)間:2016-02-18 點(diǎn)擊次數(shù):1838

            ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差,這是什么原因造成的?

            答:試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差,這是典型的由測定操作引起的問題,常見原因如下:

            a)可能原因:加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;

            解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密。

            重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與*次接近;

            重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;

            樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。

            b)可能原因:加樣過快,孔間發(fā)生污染;

            解決方法:重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過快。

            c)可能原因:加錯樣本;

            解決方法:檢查記錄和試劑,是否加錯樣本。

            d)可能原因:加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);

            解決方法:加樣槍頭不要貼壁。

            e)可能原因:不同批號試劑盒中組分混用;

            解決方法:不同批號試劑盒中組分不可混用。

            f)可能原因:溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;

            解決方法:檢查時(shí)間是否一致。

            g)可能原因:孔內(nèi)污染雜物;

            解決方法:離心樣品,排除雜物。

            h)可能原因:試劑/樣品沒有混勻;

            解決方法:充分混勻樣品和試劑。

            i)可能原因:血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血

            細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。

            解決方法:待血清標(biāo)本*凝固后做試驗(yàn)。

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